Identificação de marcadores funcionais relacionados ao estresse hídrico em nódulos de feijoeiro sob condições de FBN

Resumo

O processo de fixação biológica de nitrogênio (FBN) é bastante limitado na cultura do feijoeiro em função da ocorrência de estresses bióticos e abióticos. O aumento da capacidade de FBN nesta leguminosa, em condições tropicais, é um tema estratégico de pesquisa em uma cultura de elevada importância para o país. O objetivo do presente projeto é obter marcadores funcionais relacionados ao estresse hídrico em nódulos de feijoeiro sob condições de FBN. Um experimento de restrição hídrica em plantas de feijoeiro inoculadas com uma mistura das estirpes BR520 e BR534 de Rhizobium tropici será conduzido em condições de casa de vegetação. Após a coleta do material biológico e extração do RNA total dos nódulos, será realizado o  sequenciamento de RNA em larga escala (RNA-Seq) para identificação dos genes diferencialmente expressos. O padrão de expressão dos genes expressos em condições de estresse hídrico nos nódulos será confirmado  utilizando a transcrição reversa seguida por PCR quantitativo em tempo real (RT-qPCR). Os genes relacionados com a maior capacidade FBN sob condições de baixa disponibilidade hídrica serão utilizados para transformação genética, via Agrobacterium, da leguminosa modelo Medicago truncatula. A partir desta estratégia, ensaios in vitro serão realizados para avaliação do efeito de tais genes nos fenótipos das plantas transformadas. A elucidação dos determinantes genéticos relacionados à simbiose rizóbio-feijoeiro sob condições de seca contribuirá na seleção e desenvolvimento de genótipos mais responsivos à FBN nessas condições.