Visualização in vitro da colonização de raízes de chicória por diferentes estirpes de pseudômonas fluorescentes

Resumo

O proposto nesse trabalho é a utilização do substrato phytagel para a germinação de sementes bacterizadas com 4 estirpes pseudomonas fluorescente ( BR10418, BR10419, BR10420, BR10421) e visualização de colônias bacterianas.Sementes de chicória Cichorium endivia cv. Escarola Lisa desinfestadas superficialmente foram inoculadas com uma suspensão de inóculo (109 UFC) e, então semeadas em tubos de ensaios de 75 ml contendo o substrato Phytagel-água. Foram utilizadas três sementes por tubo e 5 repetições por estirpe. Os tubos foram deixados em câmara de crescimento a 26ºC com fotoperíodo de 12 horas, e acompanhadas, periodicamente, considerando-se os seguintes parâmetros: germinação das sementes e colonização radicular. A técnica de visualização in vitro foi para se observar a colonização de raízes pelas bactérias com emprego de tubos de ensaio com Phytagel permitindo o monitoramento visual da colonização do rizoplano pela formação de uma turbidez (névoa) de aspecto leitoso, que se forma ao longo das raízes, em consequência do crescimento bacteriano. As estirpes de pseudômonas promoveram a colonização sendo possível a visualização da colonização em diferentes sítios ao longo das raízes percebidas pela presença da névoa em torno da raiz, 10 dias após a inoculação da semente. O Phytagel por ser extremamente transparente facilitou a triagem do potencial de colonizar o sistema radicular. A confirmação da presença das bactérias nas raízes foi feita com a técnica de imprint da raiz em placa de Petri com meio solido King B (kb) e posterior  retiradas de células do imprint e riscadas em meio sólido obtendo colônias isoladas.