Isolamento de bactérias diazotróficas em 10 genótipos de Paspalum

Resumo

O nitrogênio é considerado escasso em solos tropicais, no entanto o uso do N-fertilizante pode ocasionar a contaminação dos recursos hídricos e elevar o custo energético da produção. Para alcançar a sustentabilidade das culturas torna-se necessário o uso de fontes alternativas de N, como a Fixação Biológica de Nitrogênio. Objetivou-se neste trabalho isolar bactérias diazotróficas em 10 genótipos de Paspalum.O isolamento foi realizado em 10 genótipos de Paspalum sp.(BRA 25020; BRA12254; BRA6491; BRA19186; BRA3824; BRA12424; BRA11401; BRA12700; BRA23540; BRA9610) oriundas do Banco Ativo de Germoplasma da Embrapa Pecuária Sudeste, São Carlos, SP. As amostras foram conduzidas ao Laboratório de Gramíneas, onde 5 g do solo aderido às raízes e as raízes foi transferida para tubos falcon contendo 45 mL de solução salina e agitadas por 5 minutos a 100 rpm. As raízes foram trituradas com o auxílio de um pistilo e um almofariz 45 mL de solução salina o que consistiu na diluição 10-1. Após, procedeu-se a diluição em série transferindo 1 mL da suspensão anterior a tubos de ensaio contendo 9 mL de solução salina, até a diluição 10⁻6. Em seguida uma alíquota de 0,1 mL de cada diluição foi utilizada para inocular, em triplicata, frascos contendo 5 mL dos meios semi-sólidos NFB, LGI, JNFB, LGI-P, JMV semi específico para os gêneros Azospirillum spp.; Azospirillum amazonense, Herbaspirillum spp, Gluconacetobacter e Burkholderia spp, respectivamente. Com o auxílio de uma alça de Drigalski, 20 µl de cada diluição, foi distribuído pelo método surface, em placas contendo 25 mL de meio sólido LG+ CaCO3 (DÖBEREINER et al, 1995). Foram obtidos um total de 171 isolados, 127 obtidos em meio LG+CaCO3, 20 em meio NFB; 17 em meio LGI, 7 em JNFB. No estudo, não foi possível isolar nos meios LGI-P e JMV. Dos genótipos utilizados, o genótipo BRA19186 apresentou o maior número de isolados em contraste com o genótipo BRA12424 que apresentou o menor número de isolados nos meios de cultivo utilizados.