Método de esterilização de semente de Paspalum para estudos de quimiotaxia com estirpes de Azorhizophilus paspali

Resumo

Sabe-se que há uma íntima relação entre a Azorhizophilus paspali (syn. Azotobacter paspali) e os diferentes ecótipos de Paspalum. Essas características particulares da rizosfera dessa gramínease deve possivelmente aosexudados da raiz e também dos liberados pelas sementes durante o processo de germinação.Neste sentido, esse estudo teve por objetivo selecionar interações benéficas de Azorhizophilus paspali e os diversos ecótipos de Paspalum através da avaliação semi-quantitativa,in vitro, determinada pela atração quimiotática das bactérias aos exudados liberados pelas sementes. Foram utilizadas sementes de BRA-19186 (Paspalum regnelli) provenientes do Banco de Germoplasma da Embrapa Pecuária Sudeste, em São Carlos – SP. A primeira etapa do estudo requereu a obtenção de sementes livres de contaminantes (fungos e bactérias) sem afetar a germinação. Para tanto, foram testados 8 métodos de esterilização utilizados para outras gramíneas forrageiras e de grãos. Os métodos preconizados para Paspalum (sementes de paspalum notatum , arroz , setaria , brachiaria , panicum ) não foram eficientes já que  houve crescimento de  fungos e diversas bactérias. Entretanto, duas adaptações de tratamentos de sementes de Brachiaria foram testadas e mostraram resultados satisfatórios: 1) Escarificação da semente com H₂SO₄ por 30 minutos sob agitação constante (para imersão da semente) , seguida de enxágue de 2 minutos em água destilada estéril, mais 30 minutos em água destilada estéril sob agitação e , 2) imersão em H₂SO₄ por 30 minutos sob agitação constante (para imersão da semente ), seguida de enxágue de 2 minutos em água destilada estéril e de tratamento em Hipoclorito de Sódio por 10 minutos, seguido de novoenxágue e tratamento em álcool 70%. As duas metodologias apresentaram eficiência na esterilização das sementes já que praticamente não foi observado contaminantes e a germinação não foi afetada. O tratamento com H₂SO₄ deve ter contribuído na quebra da dormência da semente, que apresentava uma baixa germinação. Os resultados obtidos revelaram
que as metodologias foram eficientes para esterilização de sementes de Paspalum e 
portanto as próximas etapas do estudo, que se referem aos testes de quimiotaxia  
envolvendo diferentes isolados de Azorhizophilus paspali e ecotipos de Paspalum,  
devem permitir selecionar interações planta/bactéria eficientes.