Classificação taxonômica de rizóbios capazes de nodular leguminosas florestais baseada no seqüenciamento do gene 16S rRNA

Resumo

Os estudos de diversidade de bactérias fixadoras de nitrogênio em simbiose com leguminosas florestais em solos tropicais têm sido cada vez mais explorados com a utilização de técnicas moleculares. O objetivo deste trabalho foi avaliar a diversidade de bactérias que nodulam as leguminosas florestais Piptadenia gonoacantha, Pseudopiptadenia contorta e Albizia pedicellaris pelo seqüenciamento quase completo da região do DNA que codifica o gene 16S rRNA. A diversidade genética foi avaliada para 27 isolados, sendo 15 deles de Piptadenia gonoacantha, 3 isolados de Pseudopiptadenia contorta e 9 isolados de Albizia pedicellaris. A extração do DNA genômico destes isolados foi realizada utilizando-se kit comercial após o prévio cultivo em meio YMA e caracterização morfofisiológica cultural. As reações de amplificação foram preparadas em volume final de 25 μL com condições especificas de PCR. Os fragmentos amplificados foram separados por eletroforese e foi utilizado como peso molecular o marcador 1kb plus DNA Ladder. Em seguida, o perfil de bandas gerado foi visualizado em fototransluminador (KODAK GL100) após o gel ter sido corado com brometo de etídeo (5 mg.mL-1) e descorado em água destilada por 1 h. Os resultados mostraram uma considerável diversidade genética onde foram encontrados 4 gêneros diferentes nodulando as três espécies florestais: Burkholderia, Bradyhrhizobium, Rhizobium e Mesorhizobium. Observou-se que uma mesma espécie de leguminosa foi nodulada por mais de um de gênero de rizóbio. As seqüências obtidas serão depositadas no banco mundial de genes do National Center for Biotechnology Information (NCBI).

Dias para apresentação: Segunda e terça-feira.