Caracterização genômica, seleção e expressão heteróloga dos genes cry de Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki S76 para o controle de pragas de interesse agrícola.

Resumo

Os avanços na área de biotecnologia indicam que é possível controlar algumas pragas em diversas culturas de interesse agrícola com um mínimo de impacto no meio ambiente. O Bacillus thuringiensis deposita, no citoplasma da célula em esporulação, inclusões cristalinas de natureza protéica com atividade para larvas de insetos de diversas ordens. Os genes cry, que codificam as delta-endotoxinas contidas no cristal, normalmente estão localizados em plasmídeos e um destes foi inteiramente sequenciado. Na maioria dos casos, o sequenciamento se restringe a fragmentos contendo os genes de delta-endotoxinas e fragmentos adjacentes. No Brasil, a estirpe S76 de B. thuringiensis, alvo de pesquisas, já mostrou uma alta atividade entomopatogênica contra o inseto Diatraea saccharalis que ataca a lavoura canavieira. O seqüenciamento (rascunho) do genoma desta estirpe já foi finalizado pela Embrapa Agrobiologia em parceria com a FASTERIS SA (Suíça), porém ainda não foi realizada a anotação das seqüências com o objetivo maior de caracterizar os diferentes genes dentro do seu "contexto genômico", que inclui a informação de operons e sequências regulatórias. Ao final do projeto espera-se ter identificado a maior parte dos genes sequenciados e isolado e clonado pelo menos 03 genes cry de interesse agrícola relacionados diretamente com atividade entomopatogênica contra a D. saccharalis e S. fugiperda. A expressão heteróloga desses genes na bactéria E. coli e bioensaios com as proteínas produzidas permitirá avaliar o potencial da bactéria Bt estirpe S76 no controle das duas principais pragas que atacam as culturas de cana-de-açúcar e milho plantadas no estado do Rio de Janeiro e Brasil.